（2）动物脂肪样品中氰戊菊酯的提取：称量10～20g样品，置于匀浆机内，加入200mL己烷和20g无水硫酸钠。
声明：本文所用图片、文字来源《分析试验室》，版权归原作者所有。使用HLB小柱对NDphA进行前处理富集。
1.4.2 色谱条件进样量为20 L，色谱柱选用GL InertSustain C18(3.0mm100 mm，2 m）或同等性能的其他色谱柱，流动相的A相为0.1%甲酸水溶液，B为甲醇。而活性炭小柱对除NDphA的其他8种物质有较好的保留效果。本文对常用的2种脱氯保存剂Na2S2O3、抗坏血酸进行了对比实验。2.3 保存条件优化因为游离氯的存在会影响前处理效果，所以样品采集时需要对样品进行脱氯。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除相关链接：乙腈，萃取柱，亚硝胺。
2 结果与讨论2.1 流动相优化比较了8种不同的流动相对仪器响应效果的影响，分别为0.1%甲酸水-甲醇、纯水-甲醇、纯水-乙腈、0.1%甲酸水-乙腈、5 mmol/L乙酸铵水-甲醇、0.1%甲酸+5 mmol/L乙酸铵水-甲醇、5 mmol/L乙酸铵水-乙腈以及0.1%甲酸+5 mmol/L乙酸铵水-乙腈。对比得出，当流动相为0.1%甲酸水-甲醇时，9种N-亚硝胺类化合物响应最高、峰形最佳，色谱图见图1。1.2仪器与设备FA2204B电子天平，上海精科天美科学仪器有限公司。
样品质量浓度：0.2mg/mL正己烷。TAG（%）产物中甘油三酯含量。分子蒸馏二次后可只保留甘油二酯组分。DSY-VI型氮吹仪，北京金科精华苑科技有限公司。
分子蒸馏一次后可除去游离脂肪酸和甘油一酯。RE-2000A旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂。
氮吹完后，加入500L异辛烷复溶，充分涡旋后离心1min(6000r/min），取200L上层清液转移至GC瓶中，供GC-MS分析。正己烷、甲醇、叔丁基甲醚、异丙醇、苯硼酸等为色谱纯级试剂。流动相：正己烷（溶有0.4%的乙酸）和叔丁基甲醚（溶有0.4%乙酸）。采用梯度洗脱，洗脱程序：0～5min,100%正己烷。
脂肪酸标品（GLC463标样），NuChek.Prep公司。再分别向有机相中加入200L衍生化试剂（PBA溶于乙醚中饱和），充分涡旋后在30℃下反应20min。纯化复溶：衍生化反应结束后，用小气流氮气吹干，氮吹温度为45℃。经0.45m有机膜过滤后进样。
再向溶液中加入25g/L甲醇钠的甲醇溶液200L，涡旋1min。油脂中还存在维生素E、植物甾醇等有益成分，在合成及纯化过程中会有一定的损失。
丙三醇、无水硫酸钠、冰乙酸、氯化钠等均为分析纯级试剂。1.3.6气相色谱分析色谱条件参照Cruz-Hernandez，色谱柱为CP-Sil88熔融石英毛细管柱（100m0.25mm0.2m）。
目前未有对分子蒸馏后花生油甘油二酯有益与有害成分的研究。充分反应后，两支试管中再分别加入600L的正己烷溶液，盖上盖子充分涡旋后离心5min(4000r/min），待反应液分层后去除有机层。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除相关链接：甘油二酯，丙三醇，正己烷。色泽采用GB/T22460-2008动植物油脂罗维朋色泽的测定。6890N型气相色谱仪，美国Agilent公司。TDL-5-A低速大容量离心机，上海安亭科学仪器厂。
UIC-KDL1分子蒸馏，德国UIC公司。样品预处理：准确称取1g菜籽油于10mL棕色容量瓶中，正己烷定容。
升温程序为60℃，以6℃/min上升至130℃，保持8min，再以20℃/min上升至250℃并保持5min。相对于化学法，酶法制备甘油二酯具有反应体系条件温和，产品纯度较高，能耗低等优势。
研究表明其具有减少内脏脂肪的积累、控制体重、降低血脂等功效。1.3.2分子蒸馏工艺研究采取两级分子蒸馏从合成产物混合物中分离和纯化甘油二酯。
测定条件：检测器：蒸发光散射检测器（Model300S，美国Softa公司）。1.3.3甘油酯纯度测定采用正相高效液相色谱法测定。酯交换反应的时间要控制在3.5～5.5min内，不断涡旋直至反应液澄清，试管A中加入600L酸化的氯化钠溶液（200g/L），试管B中加入600L酸化的溴化钠溶液（600g/L）终止酯交换反应。缩水甘油酯对人体具有致癌性，过去日本花王公司生产了Econa健康烹调油，但随后检测机构在其中检测出缩水甘油酯含量超标，致使该产品不能在市场上销售。
近几年，油脂中的缩水甘油酯和反式脂肪酸受到国内外研究者的关注。研究表明缩水甘油酯形成的过程与其前体物质有关，并将前体物质归结为单酰基甘油酯、二酰基甘油酯、三酰基甘油酯和氯。
色谱柱：HypersilBDSCPS(5m,250mm4.6mm，美国Thermo公司）。1.3.9维生素E的测定称取一定量VE标品，记录下质量，用正己烷定容。
17～17.1min,20%～100%正己烷。FID温度250℃，进样口温度250℃。
采用HPLC分析，每个样品平行测3次，绘制标准曲线。油脂在精炼脱臭过程中，高温处理会使反式脂肪酸含量增加。首先，进行一级分子蒸馏将产物体系中的脂肪酸、甘油一酯在较低温度下与酰基甘油混合物分离，一级分子蒸馏条件：蒸馏温度180℃和200℃，冷凝温度20℃，转速200r/min，真空度0.1Pa，进料速率2mL/min，然后通过二级分子蒸馏在200℃温度以上从甘油三酯中分离出甘油二酯，考察二级分子蒸馏温度对甘油二酯纯度和得率的影响。SHZ-D（Ⅲ）循环水式真空泵，巩义市予华仪器有限责任公司。
1.4统计方法用SPSS20.0对数据进行分析以及图表绘制，检测结果用MeanSD表示。1.3试验方法1.3.1酶解法生产甘油二酯利用Novozym435脂肪酶在无溶剂体系下通过甘油解反应制备甘油二酯，合成条件为：花生油与甘油物质的量比1∶2，加酶量6%，反应时间12h，反应温度70℃
模型对照组表现出明显的黏膜损伤，出现黑褐色的出血点。打开大鼠腹腔，结扎幽门与贲门，取出全胃，用PBS缓冲液冲洗胃内杂质，剪取大鼠胃组织(0.5cmO.5cm)置于2.5％戊二醛溶液中做电镜检查。
2、样品采集每组剩余14只大鼠均打开腹腔，取出全胃，结扎幽门与贲门，组织置于-80℃储存，用于相关指标的测定。二、方法1、供试物制备沙棘甾醇和盐酸雷尼替丁胶囊在灌胃给药前，研磨成粉后溶解(悬浮)于橄榄油中，通过加热磁力搅拌器和超声处理获取均质的溶液。
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